影響細(xì)胞生長最常見的五類因素
發(fā)布時間：2023-07-21 瀏覽次數(shù)：1799
細(xì)胞生長狀態(tài)受多種因素影響，在培養(yǎng)細(xì)胞時，我們知道溫度不能過高也不能過低，有些細(xì)胞培養(yǎng)前還需要包被培養(yǎng)瓶，但實驗過程中我們很容易忽略這些小因素，導(dǎo)致細(xì)胞負(fù)傷慘重。
這些小細(xì)節(jié)究竟如何影響的細(xì)胞狀態(tài)？在培養(yǎng)時我們又該如何避免？本期整理了影響細(xì)胞生長最常見的五類因素，助您完美避坑！
01 細(xì)胞生長附著物
貼壁細(xì)胞在正常情況下都會貼壁，但某些細(xì)胞本身貼壁不牢或貼壁性差，而包被附著物能夠促進(jìn)細(xì)胞的黏附，所以在培養(yǎng)一些特殊細(xì)胞時，需要對培養(yǎng)瓶/皿進(jìn)行包被后使用。常用的基質(zhì)有多聚賴氨酸（D型、L型）、明膠、膠原蛋白、細(xì)胞外基質(zhì)混合物，培養(yǎng)時可根據(jù)需要自行選擇。
小貼士：細(xì)胞貼壁差時可使用基質(zhì)包被培養(yǎng)瓶/皿。
02 細(xì)胞之間的接觸程度
正常細(xì)胞（二倍體）存在貼壁接觸抑制，長滿后細(xì)胞生長停止，而腫瘤細(xì)胞等非正常細(xì)胞，接觸抑制作用較弱，可生長至較高的細(xì)胞密度，但某些細(xì)胞一旦長過，其損傷難以逆轉(zhuǎn)，所以培養(yǎng)細(xì)胞時不建議細(xì)胞密度太高。
小貼士：無論什么細(xì)胞，都不能長滿再傳代，一般細(xì)胞匯合度達(dá)到70-80%即可傳代。
03 培養(yǎng)基PH值
大多數(shù)細(xì)胞系在PH7.4左右時生長最好，而常規(guī)培養(yǎng)基的指示劑為酚紅，所以多數(shù)情況下，我們所見的培養(yǎng)基都呈紅色，但不同培養(yǎng)基的顏色會有差異，例如DMEM比1640顏色深一點。在培養(yǎng)細(xì)胞時，也可以根據(jù)培養(yǎng)基的顏色判斷細(xì)胞狀態(tài)，如隨著細(xì)胞生長，pH值會變成黃色。
小貼士：培養(yǎng)時時刻關(guān)注培養(yǎng)基顏色變化，發(fā)現(xiàn)異常及時處理。
04 氣相成分
大部分培養(yǎng)基適合于95%空氣 5%CO2，但有部分培養(yǎng)基例外，如L15培養(yǎng)基適合于100%空氣，CO2會導(dǎo)致培養(yǎng)液PH降低（培養(yǎng)液變黃），嚴(yán)重影響細(xì)胞生長；若需要用L15培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，但沒有100%空氣培養(yǎng)箱時，可以擰緊瓶蓋或換培養(yǎng)基（效果可能更好）培養(yǎng)。適用于CO2環(huán)境的培養(yǎng)基需保持培養(yǎng)瓶透氣。
小貼士：培養(yǎng)細(xì)胞時注意參照說明書選擇培養(yǎng)基，并注意培養(yǎng)壞境。
05 培養(yǎng)溫度
對于大部分人源細(xì)胞和溫血動物細(xì)胞系來講，比較適宜的培養(yǎng)溫度是37℃，因為這個溫度接近體溫，但為了安全可以再稍低一些，高于體溫的溫度要比低于體溫的溫度更易產(chǎn)生問題。對于鳥類細(xì)胞，由于其體溫較高，所以培養(yǎng)溫度可以設(shè)置為38.5℃左右。
小貼士：培養(yǎng)細(xì)胞時保持溫度穩(wěn)定，不要長時間敞開培養(yǎng)箱的門，并且不要將培養(yǎng)器皿大量重疊堆放在培養(yǎng)箱中，避免空氣不循環(huán)。
