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細菌新型生化鑒定管使用說明
―― 070080 霍亂弧菌生化鑒定盒(11種×10次)管
一)霍亂弧菌生化鑒定盒 整套試劑及用品
鑒定生化反應的11種試劑及配套試劑4種(表1)、0.85%無菌生理鹽水10瓶、0.5 McFarland的濁度管1瓶、一次性吸管10支。
二)生化管的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)霍亂弧菌生化鑒定盒的詳細使用方法
挑取平板分離的可疑菌落進行革蘭氏染色鏡檢,將疑是霍亂弧菌的新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結果觀察見表1。注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
表1 | ||||
產品名稱 | 結果判定 | 培養(yǎng)時間(小時) | 使用說明 | |
陽性 | 陰性 | |||
1%NaCl葡萄糖產氣 | 小倒管有氣泡 | 小倒管無氣泡 | 18-24 | 使用前先確定小倒管內無氣泡 |
1%NaCl葡萄糖磷酸鹽胨水(VP) | 紅色 | 不變色 | 48 | 培養(yǎng)后依次加入10 滴 VP試劑甲液及4滴乙液,混勻,再培養(yǎng) 10-20分鐘觀察結果。 |
1%NaCl蛋白胨水 | 紅色 | 不變色 | 24 | 培養(yǎng)后加靛基質試劑2-3滴,立即觀察結果。 |
1%NaCl 蔗糖、1%NaCl甘露糖、1%NaCl阿拉伯糖、1%NaCl肌醇 | 黃色 | 紫色 | 18-24 | |
1%NaCl賴氨酸脫羧酶 | 試驗管藍綠色,對照管變黃 | 試驗管與對照管均變黃 | 18-24 | 每株被檢菌應同時接種氨基酸對照管一支,并加滅菌液體石蠟3-4滴覆蓋培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)18-24小時,未見陽性結果,繼續(xù)培養(yǎng)48h,再做最終結果判定。 |
1%NaCl精氨酸雙水解酶 | 試驗管藍綠色,對照管變黃 | 試驗管與對照管均變黃 | 18-24 | 使用方法(同上)。 |
備注:本鑒定盒是按照環(huán)凱產品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。 |
四)霍亂弧菌生化鑒定特征見表2