變化解讀 | GB 4789.30－2025《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》
發(fā)布時(shí)間：2025-04-16 瀏覽次數(shù)：133
2025年3月27日，新的GB 4789.38－2025《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)》歷經(jīng)數(shù)載終于與大家見(jiàn)面了。食品伙伴網(wǎng)將GB 4789.30（2025版）與GB 4789.30-2016進(jìn)行了比對(duì)，內(nèi)容僅供參考。
一、主要變化
1、增加了OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方。
2、修改了適用范圍；
3、修改了培養(yǎng)基和試劑；
4、修改了第一法 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌定性檢驗(yàn)增菌液、選擇性培養(yǎng)基、檢驗(yàn)程序、 鑒定方法等；
5、修改了第二法 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌平板計(jì)數(shù)法的樣品接種、菌落計(jì)數(shù)和確認(rèn)、 結(jié)果計(jì)數(shù)、結(jié)果報(bào)告；
6、修改了第三法 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌MPN計(jì)數(shù)法的樣品接種。
二、詳細(xì)內(nèi)容比對(duì)
1，修改了標(biāo)準(zhǔn)的范圍描述
新標(biāo)準(zhǔn)中第三法范圍刪除了 (<100CFU/g)而雜菌含量較高 和 特別是牛奶、水以及含干擾菌落計(jì)數(shù)的顆粒物質(zhì)的食品 的限定表述。
2，修改了部分設(shè)備和培養(yǎng)基試劑
a、增加25~30°C恒溫培養(yǎng)箱，對(duì)于冰箱、顯微鏡、生化鑒定等設(shè)備參數(shù)進(jìn)行微調(diào)。
b、由于國(guó)際、國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，ISO 標(biāo)準(zhǔn)采用了 Fraser 增菌肉湯(FB1、FB2)，分離平板包含 OA 李斯特氏菌顯色平板，新標(biāo)準(zhǔn)參照ISO的方法，對(duì)其培養(yǎng)基進(jìn)行調(diào)整，與國(guó)際接軌；增菌培養(yǎng)基由原來(lái)的“李氏增菌肉湯 LB(LB1,LB2)”改為“Fraser 增菌肉湯(FB1、FB2)”，分離培養(yǎng)基增加 “OA李斯特氏菌顯色平板”。
c、培養(yǎng)基還增加了“無(wú)菌磷酸鹽緩沖液、無(wú)菌生理鹽水”，刪除了緩沖蛋白胨水。
3，修改了第一法檢驗(yàn)程序
檢驗(yàn)程序中除了對(duì)于分離培養(yǎng)基進(jìn)行微調(diào)外，還對(duì)于生化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了詳細(xì)的列舉，流程更完整、完善。
4，修改了第一法操作步驟
a、修改并增加了液態(tài)樣品制備的操作部分，針對(duì)固體、半固體及其他樣品采用拍打式和高速旋轉(zhuǎn)式進(jìn)行樣品處理分開(kāi)描述，更詳細(xì)。
b、新標(biāo)準(zhǔn)中增加了分離時(shí)需要混勻的具體要求，并增加了PALCAM 瓊脂平板上菌落大小的描述，更直觀、更具體；新增培養(yǎng)基的菌落特征也很詳細(xì)，并且增加了其他亞菌種的形態(tài)說(shuō)明。
c、新標(biāo)準(zhǔn)中把純培養(yǎng)的過(guò)程單列出來(lái)，這樣再進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)的菌落來(lái)源更清晰、明確。
d、鑒定實(shí)驗(yàn)步驟中，修改了部分文字描述，使整個(gè)的表述更加具體，更加清晰直觀。
5，修改了第二法中操作步驟中的部分描述
a、新標(biāo)準(zhǔn)中稀釋液由“緩沖蛋白胨水或無(wú)添加劑的 LB 肉湯”替換為“磷酸鹽緩沖液或無(wú)添加劑的 Fraser 增菌肉湯”。還將振搖試管或換用1支1mL無(wú)菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻的描述刪除了，不再限制混勻的方式，只要充分混勻即可。與第一法一致增加了液態(tài)樣品的樣品制備操作步驟。
b、單增李斯特菌限量指標(biāo) GB 29921-2021《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品中致病菌限量》中的水產(chǎn)制品（僅適用即食生 制動(dòng)物性水產(chǎn)制品），其要求的檢出限為小于等于 100 CFU/g。吸 0.1 mL 接種 2 塊李斯特氏菌顯色平板方法檢出限可以滿(mǎn)足該要求。
由此新標(biāo)準(zhǔn)中的樣品的接種，新增了2-3個(gè)適宜連續(xù)稀釋度，每個(gè)稀釋度分別吸取0.1m,樣品勻液接種 OA 李斯特顯色平板涂布的方法。
作為配套的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，“0.1 mL、0.1 mL 涂布法” 已能滿(mǎn)足現(xiàn)行產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)需要。同時(shí)繼續(xù)保留“0.3mL、0.3mL、0.4mL 涂布法”，滿(mǎn)足檢出限 更低的需求和方法的延續(xù)性。
c、新標(biāo)準(zhǔn)中2025 版標(biāo)準(zhǔn)提出要求，從樣品稀釋至樣品接種完畢不得超過(guò) 45min。
6，完善了平板結(jié)果計(jì)算與報(bào)告
結(jié)果計(jì)算與報(bào)告在2016版的基礎(chǔ)上進(jìn)行了細(xì)化，菌落生長(zhǎng)大于和小于100的情況分別給出了相關(guān)要求描述。
7，第三法的樣品接種增菌培養(yǎng)基變化
8，第三法中需要驗(yàn)證的菌落數(shù)量變化
9，附錄A 培養(yǎng)基與試劑部分的主要變化
● 對(duì)李斯特氏菌檢測(cè)相關(guān)培養(yǎng)基及試劑方案進(jìn)行了修訂。Fraser增菌肉湯FB1、FB2取代了原標(biāo)準(zhǔn)中的李氏增菌肉湯LB1、LB2；
● 明確規(guī)定了OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基的配方；
● 對(duì)PALCAM培養(yǎng)基選擇性添加劑的配制方法進(jìn)行了勘誤；
● 緩沖葡萄糖蛋白胨水和糖發(fā)酵管的pH值要求有所變更；
● 新增無(wú)菌磷酸鹽緩沖液和無(wú)菌生理鹽水，取消緩沖蛋白胨水（BPW）的使用。
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